מה זה PCR?
תגובת שרשרת פולימראז (PCR) היא טכניקת מעבדה המשמשת להגברת עותקים בודדים או כמה עותקים של פיסת DNA בכמה סדרי גודל, ויוצרת אלפי עד מיליוני עותקים של רצף DNA מסוים. PCR משמש להגברת שברי DNA בעלי עניין לצורך ניתוח נוסף כגון רצף DNA, שיבוט או בדיקות גנטיות.
איך עובד PCR?
PCR הוא תהליך בן שלושה שלבים המשתמש באנזים DNA פולימראז כדי לסנתז גדילים חדשים של DNA מגדיל תבנית. השלב הראשון הוא שלב הדנטורציה, הכולל חימום הדגימה כדי להפריד בין שני הגדילים של הסליל הכפול של ה-DNA. השלב השני הוא שלב החישול, הכולל קירור הדגימה כדי לאפשר לפריימרים להיקשר ל-DNA התבנית. הפריימרים הם חלקים קצרים של DNA המשלימים ל-DNA התבנית. השלב השלישי הוא שלב ההרחבה, הכולל הוספת נוקלאוטידים לפריימרים כדי ליצור גדילים חדשים של DNA.
כמה זמן לוקח PCR?
הזמן שלוקח להשלמת תגובת PCR תלוי במספר גורמים, כולל סוג ה-PCR המבוצע, מספר המחזורים וסוג ה-DNA פולימראז בשימוש. בדרך כלל, תגובת PCR יכולה להימשך בין 1-3 שעות להשלמה. עם זאת, אם תגובת ה-PCR משמשת ליישום מורכב יותר, כגון שיבוט או רצף, זה יכול להימשך עד מספר ימים להשלמתו.
שאלות ותשובות
ש: מה ההבדל בין PCR ל-qPCR?
א:
PCR ו-qPCR הן שתיהן טכניקות מעבדה המשמשות להגברת DNA. ההבדל העיקרי בין השניים הוא ש-qPCR היא טכניקת PCR כמותית, כלומר היא יכולה למדוד את כמות ה-DNA הקיימת בדגימה. qPCR רגיש יותר מ-PCR ויכול לזהות כמויות קטנות מאוד של DNA.
ש: מה ההבדל בין PCR לרצף DNA?
א:
PCR ורצף DNA הן שתיהן טכניקות מעבדה המשמשות לניתוח DNA. PCR משמש להגברת עותקים בודדים או כמה עותקים של פיסת DNA בכמה סדרי גודל, בעוד שרצף DNA משמש לקביעת הסדר המדויק של נוקלאוטידים במולקולת DNA.
ש: מה ההבדל בין PCR לבין שיבוט?
א:
PCR ושיבוט הן שתי טכניקות מעבדה המשמשות לתמרן DNA. PCR משמש להגברת עותקים בודדים או כמה עותקים של פיסת DNA בכמה סדרי גודל, בעוד שיבוט משמש ליצירת עותקים מרובים של גן או שבר DNA.
סיכום
PCR היא טכניקת מעבדה רבת עוצמה המשמשת להגברת עותקים בודדים או כמה עותקים של פיסת DNA במספר סדרי גודל. הזמן שלוקח להשלמת תגובת PCR תלוי במספר גורמים, כולל סוג ה-PCR המבוצע, מספר המחזורים וסוג ה-DNA פולימראז בשימוש. בדרך כלל, תגובת PCR יכולה להימשך בין 1-3 שעות להשלמה. עם זאת, אם תגובת ה-PCR משמשת ליישום מורכב יותר, כגון שיבוט או רצף, זה יכול להימשך עד מספר ימים להשלמתו.